第二节  Apo B突变与受体结合的关系

    一般认为, 人类血浆中LDL颗粒仅含有一个分子Apo B100。杂合子FDB者体内则应存在两种LDL颗粒, 即一种LDL颗粒含有正常的Apo B100; 另一种LDL颗粒则含有突变的Apo B100。如果有方法将这两种LDL颗粒分离, 就可更清楚地知道含有突变Apo B100的LDL颗粒与受体结合障碍的程度。有人发现一种单克隆抗体即MB19对不同LDL颗粒中Apo B100具有不同的反应性, 对某些Apo B100亲和性较对其他ApoB100高出11倍。所以, 应用MB19免疫亲和层析法, 可从FBD杂合子者血浆中分离出富含缺陷Apo B100的LDL部分。 而这部分LDL与受体的亲和力仅为正常的10%。由于采用这种方法分离出来的含有突变Apo B100的LDL中仍然掺杂有正常的LDL(大约占5-7%), 因而推测异常的LDL颗粒实际上仅具有3-5%正常LDL的受体结合能力。Apo B100是一个由4536个氨基酸组成的蛋白质, 仅仅是因单一氨基酸被置换, 就产生与受体结合的能力完全障碍, 的确有些令人吃惊。

    应用物理生物化学方法进行研究提示, 3500位突变可引起Apo B100局部结构紊乱。而采用循环二色性法检测正常的和FDB的LDL二级结构, 发现两者基本相同。但是, 利用13C核磁共振技术发现, FDB者LDL中六个赖氨酸的徽环境发生了改变, 引起其pK值从8.9变为10.5。已知赖氨酸影响Apo B100与受体结合的部位。所以, 有可能Apo B100中3500 位精氨酸被谷酰胺置换后, 改变了位于突变部位附近赖氨酸残基的pK值, 因而影响Apo B100的受体结合功能域。由此推测, 位点突变很可能使Apo B100的受体结合功能域二级结构的构形发生变化, 产生其与受体结合障碍。